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添加时间:2019-05-31
为不断完善环境微生物学实验课程建设,培养学生的实际样品分析能力,设计了一套检测水样中大肠菌数的实时荧光定量PCR(pdymerase chain reaction)实验。教学实践表明,实验方案切实可行,学生完成情况良好,学生了解并践行了实时荧光定量PCR技术检测环境样品中的大肠菌数的方法,切身体会到新实验技术的简便性与灵敏性,提升了学生的学习兴趣与创新能力。 采集荧光信号),40个循环,融解曲线分析60~95℃。2.5标准曲线的制作将上述已知浓度的质粒先稀释为1010copy/μL,再按10倍稀释,以浓度为1的质粒作为标准样品,制作定量标准曲线。理想的标准曲线:基线平整本文由公司网站滚圆机网站采集转载中国知网整理! http://www.g unyuanji158. com/,相影响的对比研究-电动折弯机数控滚圆机滚弧机张家港电动液压滚圆机滚弧机折弯机关系数有R2≥0.98,扩增效率在0.9~1.1之间,越接近于1越好[11]。图3(a)是E1和E2定量大肠菌群的扩增曲线(ΔRn为样品荧光信号值与空白对照的差值),从曲线中可以看出,标线的基线平整,指数范围大,平台期汇于一起。图3(b)为标准曲线,由标准曲线可以得到扩增效率为93.941%,R2=0.999,符合理想标准曲线的要求,结合融解曲线分析知定量准确。图3定量大肠菌数的标准曲线3教学实践3.1教学实践的开展由实验教师带领部分学生用盖玻片、滤纸和盖玻片+擦镜纸3种血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳点样方法对电泳结果的影响,评价盖玻片与擦镜纸相结合的新型点样方法在教学实验中的应用效果,并分析3组的蛋白质相对含量有无差异。结果表明:在相同实验条件下,盖玻片+擦镜纸组的电泳结果优于其他2种,3组的蛋白质相对含量无明显差异;盖玻片与擦镜纸相结合的点样方法较单纯使用盖玻片或滤纸的点样方法点样成功率有很大提高,出现的不良结果较少,能有效解决学生在电泳实验操作中的点样问题,可在教学实验中推广影响的对比研究-电动折弯机数控滚圆机滚弧机张家港电动液压滚圆机滚弧机折弯机。 本文由公司网站滚圆机网站采集转载中国知网整理! http://www.g unyuanji158. com/